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革兰氏染色液试剂盒也有使用方法?

发布时间:2021-11-19   点击次数:258次
  革兰氏染色液试剂盒革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌细胞壁较厚,肽聚糖网层次较多且交联致密,乙醇脱色时,肽聚糖脱水使孔径缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上,呈紫色。革兰氏阴性菌细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,脱色后类脂外膜迅速溶解,缝隙加大,结晶紫与碘复合物溶出,因此乙醇脱色后再经番红复染,呈红色。
 
  革兰氏染色液试剂盒的操作步骤:
 
  1.涂片固定:菌液涂片时不可过于浓厚,干燥、固定。固定时通过火焰1-2次即可,不可过热,以载玻片不烫手为宜。
 
  2。染色:一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:加上结晶紫后,染色,水洗。加上碘液后染色,水洗。加上酒精,摇动玻片,根据涂片厚度,脱色,水洗,吸去水分。加上蕃红后,染色,水洗。吸干或在空气中凉干后,油镜镜检。
 
  3.结果观察:革兰氏阴性菌呈红色,革兰氏阳性菌呈紫色。以均匀分散开的细菌的革兰氏染色反应为准,过于密集的细菌,常常呈现假阳性。
 
  革兰氏染色液试剂盒革兰氏染色的关键在于严格掌握酒精脱色程度,如脱色过度,则阳性菌可被误染为阴性菌;而脱色不够时,阴性菌可被误染为阳性菌。此外,菌龄也影响染色结果,如阳性菌培养时间过长,或已死亡及部分菌体自行溶解,都常呈阴性反应。
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