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大肠杆菌显色培养基的实验原理和注意事项

发布时间:2021-07-23   点击次数:370次
   大肠杆菌显色培养基主要用于大肠杆菌的快速分离和鉴定。培养基为选择性培养基,同时检测水和食品中的大肠杆菌和大肠菌群,它可使受损的大肠菌群快速恢复。除了常规营养外,培养基还含有月桂基硫酸钠、L-色氨酸和显色混合剂。显色混合剂同时检测β半乳糖苷酶和葡萄糖醛酸酶。L-色氨酸用于吲哚反应。大肠菌群为β半乳糖苷酶(+),大肠杆菌为β半乳糖苷酶(+)和葡萄糖醛酸酶(+),大肠杆菌O157为葡萄糖醛酸酶(-)。
 
  大肠杆菌显色培养基实验原理:白胨和酵母膏粉提供氮源和微量元素,氯化钠可维持均衡的渗透压,十二烷基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌,琼脂是培养基凝固剂;显色底物与大肠杆菌的ß-半乳葡糖苷酶发生特异反应,水解底物,释放显色基团,使大肠杆菌菌落显示绿色。大肠杆菌分解蛋白胨中的色氨酸,生成靛基质,与靛基质试剂作用,在大肠杆菌菌落周围形成玫瑰吲哚而呈红色。大肠杆菌典型菌落为蓝绿色,大肠菌群为无色菌落,其它细菌为无色或黄色菌。
 
  需要注意的是:使用过的大肠杆菌显色培养基需要在121℃灭菌至少20分钟才可以按照有关规定丢弃。制备好的平板应立即使用,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处,保存温度2-8℃,注意避光保存。干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
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