一:
革兰氏染色液试剂盒的检验原理:
1、通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密。
2、故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此,能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内。
3、使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出。
4、因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。
二:革兰氏染色液试剂盒的操作步骤:
1、标本处理:
有菌部位的标本,如痰液、粪便、各种拭子、创面等可直接涂片。
无菌部位的标本,如脑脊液、胸水、腹水、胆汁、尿液、关节液等,应取适量标本,3000rpm离心10min。取沉渣涂片染色。
2、涂片制作:菌液涂片时,用接种环沾取菌液点在载玻片上,标本可直接在玻片上涂布;菌落涂片时,先取生理盐水一滴,置玻片上,用接种针挑取菌落在盐水中涂布。制作的涂片应自然干燥,并经火焰固定,固定的温度不宜过高,以玻片背面接触手背不烫为准,否则可能使细菌形态改变。将固定后的涂片进行染色。
三:革兰氏染色液试剂盒的注意事项:
1、标本涂片不能太厚,严格按操作要求进行。
2、玻片通过火焰温度不能太高。
3、若涂片较厚,应延长脱色时间,直至不再出现紫色为止。
4、碘液变透明,则不能使用。
5、水洗时动作要轻柔,沿载玻片对角线方向用洗瓶冲洗,以免把菌体冲掉。
总结:染色液试剂盒的检验原理及注意事项就由小编分享到这了,看完本文您就应该有了基本的认识和了解相信大家都明白了吧!总的来说,希望对大家有所帮助。