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MRS琼脂的制备步骤是怎样的?需要注意哪些关键步骤?

更新时间:2024-04-21   点击次数:35次
  MRS琼脂是一种常用于乳酸菌选择性培养的固体培养基。以下是MRS琼脂的制备步骤:
 
  1、准备所需材料:蒸馏水、磁力搅拌器、pH计、高压灭菌锅、无菌操作台、培养皿等。
 
  2、称量:根据实验需要,称取适量的琼脂粉。通常,每升蒸馏水需要加入135克琼脂粉。
 
  3、溶解:将称好的加入蒸馏水中,使用磁力搅拌器搅拌均匀,直至溶解。注意不要加热过快,以免影响培养基的质量。
 
  4、调节pH值:使用pH计测量溶液的pH值,根据推荐pH范围(通常为5.7±0.2),用稀盐酸或稀氢氧化钠溶液调节pH值。调节过程中要缓慢滴加,避免pH值波动过大。
 
  5、高压灭菌:将调好pH值的溶液倒入高压灭菌锅中,进行高压蒸汽灭菌。通常,灭菌条件为121℃,15分钟。灭菌完成后,待压力降至安全范围内,方可打开锅盖。
 
  6、倒平板:在无菌操作台上,将灭菌后的溶液倒入无菌的培养皿中,每个培养皿约倒入15-20毫升。倒完平板后,轻轻摇晃培养皿,使琼脂均匀分布。
 
  7、凝固:将倒好的平板放置在室温下,待琼脂凝固。凝固时间通常为15-30分钟。凝固后的平板可立即使用,也可放入4℃冰箱保存备用。
 
  8、储存:未使用的平板应储存在4℃冰箱中,避免长时间暴露在高温和潮湿环境中,以免影响其质量。
 

MRS琼脂

 

  在制备MRS琼脂的过程中,需要注意以下关键步骤:
 
  1、确保所用材料和器具的无菌性,避免污染。
 
  2、溶解时,要确保充分搅拌,使其溶解。
 
  3、调节pH值时,要缓慢滴加稀盐酸或稀氢氧化钠溶液,避免pH值波动过大。
 
  4、高压灭菌时要确保灭菌条件达到要求,以保证培养基的无菌性。
 
  5、倒平板时要在无菌操作台上进行,避免污染。
 
  6、凝固后的平板要及时使用或储存在4℃冰箱中,避免长时间暴露在高温和潮湿环境中。
 
  总之,在制备MRS琼脂的过程中,要严格遵循操作规程,确保培养基的质量和无菌性,为乳酸菌的选择性培养提供良好的基础。
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