MRS琼脂是一种常用于乳酸菌选择性培养的固体培养基。以下是
MRS琼脂的制备步骤：
1、准备所需材料：蒸馏水、磁力搅拌器、pH计、高压灭菌锅、无菌操作台、培养皿等。
2、称量：根据实验需要，称取适量的琼脂粉。通常，每升蒸馏水需要加入135克琼脂粉。
3、溶解：将称好的加入蒸馏水中，使用磁力搅拌器搅拌均匀，直至溶解。注意不要加热过快，以免影响培养基的质量。
4、调节pH值：使用pH计测量溶液的pH值，根据推荐pH范围(通常为5.7±0.2)，用稀盐酸或稀氢氧化钠溶液调节pH值。调节过程中要缓慢滴加，避免pH值波动过大。
5、高压灭菌：将调好pH值的溶液倒入高压灭菌锅中，进行高压蒸汽灭菌。通常，灭菌条件为121℃，15分钟。灭菌完成后，待压力降至安全范围内，方可打开锅盖。
6、倒平板：在无菌操作台上，将灭菌后的溶液倒入无菌的培养皿中，每个培养皿约倒入15-20毫升。倒完平板后，轻轻摇晃培养皿，使琼脂均匀分布。
7、凝固：将倒好的平板放置在室温下，待琼脂凝固。凝固时间通常为15-30分钟。凝固后的平板可立即使用，也可放入4℃冰箱保存备用。
8、储存：未使用的平板应储存在4℃冰箱中，避免长时间暴露在高温和潮湿环境中，以免影响其质量。
在制备MRS琼脂的过程中，需要注意以下关键步骤：
1、确保所用材料和器具的无菌性，避免污染。
2、溶解时，要确保充分搅拌，使其溶解。
3、调节pH值时，要缓慢滴加稀盐酸或稀氢氧化钠溶液，避免pH值波动过大。
4、高压灭菌时要确保灭菌条件达到要求，以保证培养基的无菌性。
5、倒平板时要在无菌操作台上进行，避免污染。
6、凝固后的平板要及时使用或储存在4℃冰箱中，避免长时间暴露在高温和潮湿环境中。
总之，在制备MRS琼脂的过程中，要严格遵循操作规程，确保培养基的质量和无菌性，为乳酸菌的选择性培养提供良好的基础。
