3%NaCl精氨酸双水解酶生化管的使用方法与原理

一、用途：

用于副溶血性弧菌生化鉴定。

二、实验原理：

某些细菌可产生精氨酸脱羧酶，使精氨酸脱去羧基，生成精胺，从而使培养基变碱性并通过指示剂变色来观察。脱羧酶是适应酶或称诱导酶，对底物有特异性，在无相对氨基酸的培养基中不产生此酶，并且需要酸性环境和适宜温度。故在培养基中加入葡萄糖，使细菌发酵葡萄糖产酸，以利于脱羧酶的产生。氨基酸的分解是在厌氧条件下进行，故在培养基表面加液体石蜡。由于细菌发酵葡萄糖产酸，在培养初期培养基和对照培养基呈黄色，继续培养时，若氨基酸经脱羧或水解产生胺类则培养基变碱，呈紫色或紫红色，即为阳性反应；如至培养末期培养基如同对照管一样均呈黄色，则判为阴性反应。

二、培养基成分（g/L）：

四、试验方法：

1. 将标准储备菌株接种到非选择性肉汤中或采用其他制备方法，制备成5 McFarland浊度（约10⁹CFU/ml）的菌悬液。

2. 吸取0.05ml-0.08ml(约1-2滴)菌悬液至生化管中，并覆盖一层无菌液体石蜡，并同时做无氨基酸对照生化管，36±1℃培养24±2h后，观察实验结果。

五、微生物试验:

接种以下质控菌株，36±1℃培养24±2h：

六、方法的局限性

本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。