一、试验原理:
用于链球菌的分离培养。
细菌蛋白胨、牛心浸粉提供氮源、碳源、维生素和生长因子;葡萄糖提供碳源;氯化钠用于维持细胞渗透压;碳酸钠和磷酸氢二钠提供无机盐以及作为缓冲剂维持培养基的pH;琼脂作为培养基的凝固剂。
二、培养基配方(g/L):
细菌蛋白胨 | 20.0 |
牛心浸粉 | 3.1 |
碳酸钠 | 2.5 |
葡萄糖 | 2.0 |
氯化钠 | 2.0 |
磷酸氢二钠 | 0.4 |
琼脂 | 15.0 |
pH值7.8±0.2(25℃) |
三、试验方法:
1. 称取本品45.0 g,加热溶解于1000 mL蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟,备用。
2. 制备质控菌液;
3. 选择合适稀释度的质控菌液100 μL,均匀涂布于待测培养基上,用TSA琼脂做对照培养基,计算回收率;
4. 放置36±1℃需氧培养24-48小时,记录试验结果。
四、试验结果判断:
接种以下质控菌株,放置于36±1℃需氧培养24-48小时。
质控菌株 | 菌株编号 | 接种量 (CFU) | 回收率 | 生长情况 | 其他特征 |
溶血性链球菌 | CMCC(B) 32210 | 10-100 | ≥70% | +++ | 白色小菌落 |
粪链球菌 | ATCC 29212 | 10-100 | ≥70% | +++ | 白色小菌落 |
金黄色葡萄球菌 | ATCC 25923 | 10-100 | ≥70% | +++ | 乳白色大菌落 |
化脓性链球菌 | ATCC 19615 | 10-100 | ≥70% | +++ | 白色小菌落 |
图1 Todd-Hewitt琼脂培养基微生物质控结果
注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。