一、试验原理:
用于快速鉴别念珠菌。根据酶底物法,通过显色区别不同念珠菌,25-30℃培养48小时,白色念珠菌显绿色,热带念珠菌显蓝灰色,光滑念珠菌显淡紫色至紫色,克柔假丝酵母显紫粉色,其他念珠菌显白色,细菌被抑制。
二、培养基配方(g/L):
营养物质(蛋白胨等) | 30.0 |
色素 | 3.4 |
氯霉素 | 0.1 |
琼脂 | 15.0 |
pH 6.0±0.2 25℃ |
三、试验方法:
1. 称取本品9.7g(可按4.85g/100ml的比例扩大或缩小),加入200ml蒸馏水或纯化水中,加热溶解并不停搅拌,煮沸不要超过1分钟。将加热后的培养基水浴冷却至45-50℃,轻轻地摇匀,倾入无菌平皿,备用
2. 制备好的平板保存于2-8℃,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处,室温保存。
3. 使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。
4. 制备质控菌液
5. 取一环质控菌液划线接种到念珠菌显色培养基上。
6. 25-30℃倒置培养基培养48-72小时,记录实验结果。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株,25-30℃倒置培养基培养48-72小时:
质控菌株 | 菌株编号 | 生长情况 | 其他特征 |
白色念珠菌 | CMCC(F)98001 | +++ | 绿色菌落 |
热带念珠菌 | / | +++ | 蓝灰色菌落 |
克柔氏假丝酵母菌 | / | +++ | 紫红色菌落 |
光滑念珠菌 | / | +++ | 淡紫色至紫色菌落 |
其他念珠菌 | / | +++ | 白色菌落 |
大肠埃希氏菌 | ATCC25922 | - | / |
图1 念珠菌显色培养基微生物质控结果
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