一、试验原理:
用于细菌靛基质试验。
蛋白胨提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;含有色氨酸酶的细菌,能分解蛋白胨中的色氨酸,形成靛基质(吲哚)。靛基质无色,当加入对氨基苯甲酸试剂后,形成可见的红紫色醌式化合物,即玫瑰靛基质。
二、培养基配方(g/L):
蛋白胨 | 10.0 | ||
氯化钠 | 5.0 | ||
pH7.4 | 25℃ |
三、试验方法:
1. 将标准储备菌株接种到非选择性肉汤中或采用其他制备方法,制成5 McFarland浊度(约109CFU/ml)的菌悬液。
2. 吸取0.05-0.08ml(约1-2滴)至生化管内,36±1℃培养18-24h后,滴加Kovacs靛基质试剂2-3滴,观察试验结果。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株,36±1℃培养18-24h:
质控菌株 | 菌株编号 | 生长情况 | 其他特征 |
大肠埃希氏O157菌 | ATCC35150 | +++ | 阳性,有红色环 |
大肠埃希氏菌 | ATCC25922 | +++ | 阳性,有红色环 |
鼠伤寒沙门氏菌 | ATCC14028 | +++ | 阴性,有黄色环 |
产气肠杆菌 | ATCC13048 | +++ | 阴性,有黄色环 |
图1-1 蛋白胨水生化管质控结果
五、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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