一、试验原理:
大肠杆菌/大肠菌群显色培养基(第二代)是青岛海博生物公司再次改良的培养基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大肠杆菌和大肠菌群的快速检测。大肠杆菌和大肠菌群分别具有特异性的酶,利用其分解底物得到产物的不同来区分大肠杆菌和大肠菌群。大肠杆菌显蓝色至紫色,大肠菌群显红色,革兰氏阳性菌被抑制。
二、培养基配方(g/L):
特殊营养物质 | 33.0 |
显色剂 | 0.3 |
琼脂 | 13.0 |
pH 6.8-7.2 25℃ |
三、试验方法:
1.称取本品46.3g加入1000ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸不要超过1分钟。取1ml制备好的样品液加入直径为9cm无菌平皿中心,倾入冷却至45-50℃ 培养基约15ml,混匀,凝固后,再加入一层培养基进行履盖。 或冷却至45-50℃时,倾入无菌平皿,琼脂全部凝固后,在37℃的培养箱中倒置放置1-2小时,加入适当稀释度的样品液1ml,涂布于培养基上,36℃培养18~24h。
2.选用有30~200个菌落的平板,计数平板上出现的典型大肠菌群和大肠杆菌菌落。大肠杆菌典型菌落为蓝色至紫色,大肠菌群为粉红色菌落,其它细菌为无色或黄色菌落;
总大肠菌群=蓝色菌落+紫色菌落+粉红色菌落
大肠杆菌=蓝色菌落+紫色菌落。
3.对可疑大肠杆菌菌落可划线接种到营养琼脂平板上,36℃培养12-16小时,挑取单菌落做大肠杆菌全套生化试验(本公司有生化鉴定管套装4种x4套)。
四、结果观察与解释
在36℃培养18~24h小时:
质控菌株 | ATCC | 生长情况 | 菌落颜色 |
金黄色葡萄球菌 | 25923 | -/+ | 无色 |
大肠杆菌 | 25922 | +++ | 蓝色 |
沙门氏菌 | 14028 | +++ | 无色 |
阴沟肠杆菌 | 23355 | +++ | 粉红色 |
产气肠杆菌 | 35029 | +++ | 粉红色 |
弗氏柠檬酸盐杆菌 | 43864 | +++ | 粉红色 |
肺炎克雷伯氏菌 | 10031 | +++ | 粉红色 |
图1典型特征:大肠杆菌典型菌落为蓝色至紫色,大肠菌群为粉红色菌落,其它细菌为无色菌落。
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