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乳酸杆菌选择性培养基原理及实验现象

更新时间:2024-06-20   点击次数:124次

一、用途:

  用于乳酸菌的分离培养。


二、实验原理:

  胰酪蛋白胨、牛酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖提供碳源;磷酸氢二钾为缓冲剂;枸橼酸三铵、硫酸镁、硫酸锰、硫酸亚铁、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子,吐温80为乳酸杆菌提供所需的代谢脂肪酸;柠檬酸铵和乙酸钠能够抑制一些杂菌的生长,包括链球菌、霉菌和除乳酸杆菌外的大多数口腔微生物菌群;加入乙酸,使pH值降低,抑制了其它细菌的生长,有利于乳酸杆菌的分离;加入碳酸钙是由于乳酸菌在培养基中产酸可以形成溶钙环,便于区分;琼脂是培养基的凝固剂。


三、培养基配方(g/L):

酵母浸粉

2.0

胰酪蛋白胨

10.0

磷酸二氢钾

2.0

牛肉浸粉

10.0

硫酸镁

0.2

葡萄糖

20.0

乙酸钠

5.0

枸橼酸三铵

2.0

硫酸锰

0.05

碳酸钙

5.0

吐温80

1.0

琼脂

25.0

pH 6.0-6.5  25℃

此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果

四、试验方法:

  1、称取本品82.25g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶 200ml,115℃高压灭菌 15-20min,冷至 50℃左右时,倾入无菌平皿,备用。

  2、制备质控菌液。

  3、用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划三区,同时接种两个平板。

  4、36±1°C下培养24-48小时,记录实验结果。


五、结果观察与解释:

  接种以下质控菌株,在36±1℃下培养24-48小时:

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

方法

质控评定标准

其他特征

嗜酸乳杆菌

CICC6005

/

定性

+++

白色突起菌落,有溶钙环

植物乳杆菌

ATCC8014

/

定性

+++

白色突起菌落,有溶钙环


图1 植物乳杆菌微生物质控结果


六、注意事项:

  本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。



注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。


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