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改良Skirrow氏琼脂基础的原理及实验现象

更新时间:2024-04-09   点击次数:96次

一、用途:

 用于空肠弯曲杆菌的分离培养(GB4789.9-2014,GB4789.28-2013,ISO标准)
二、实验原理:
 蛋白胨、酵母浸粉和胰酪蛋白胨提供碳源、氮源、维生素和矿物质;氯化钠提供均衡的渗透压;无菌冻融脱纤维羊血提供额外的营养物质;铁、焦亚硫酸钠和丙酮酸钠有利于空肠弯曲菌的生长;TMP、多粘菌素B和万古霉素可抑制样本中非弯曲菌的生长,从而便于分离空肠弯曲菌;琼脂是凝固剂。
三、培养基配方(g/L)

捕获11.JPG

 FBP溶液:丙酮酸钠、焦亚硫酸钠、铁各0.25g溶解于100mL纯化水中,用0.22μm微孔滤膜过滤除菌。
 抗生素溶液:称取头孢哌酮0.032g,两性霉素B0.01g,利福平0.01g,溶解于5mL 50%无菌乙醇溶液中。
 配制方法:称取基础培养基4.25g,加热搅拌溶解于100ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,冷至50-55℃左右时,加入1ml过滤除菌的FBP浓原液、一支改良Skirrow氏琼脂基础添加剂(万古霉素mg,TMP0.5mg,多粘菌素B 250 IU)1mL和无菌冻融脱纤维羊血5ml,混匀,倾入无菌平皿。
四、试验方法:
 1、制备质控菌液。
 2、将质控菌液划线接种于平板。
 3、42±1℃微需氧培养24-48小时,记录实验结果。
五、结果观察与解释
 接种以下质控菌株,42±1℃微需氧培养24-48小时:

捕获22.JPG

图1-1 改良Skirrow氏琼脂基础质控结果
a:空肠弯曲菌,b:大肠埃希氏菌,c:jin黄色葡萄球菌

六、注意事项
 本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。



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