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培养基保存的注意事项

发布时间:2022-05-07   点击次数:446次

 一、商品化脱水干燥培养基的保存
 (1)湿度:干粉培养基具有很强的吸湿性,因此必须在保存的干燥的环境中,特别是已经开瓶的培养基,需要尽可能在湿度低的环境中密封保存。如保存过程中发现培养基出现吸潮结块、粘稠变色等现象,则不能使用。
  注:有些培养基因干粉中添加了吐温80(如MRS培养基)等液体成分,粉末略有粘连或小块状,可以轻松压碎,并非吸潮导致,不影响使用。
 (2)温度:多数商品化脱水培养基可常温保存(一般指10-30℃)或阴凉处保存(一般指不超过20℃),对于含不稳定成分的培养基(如某些抗生素、显色底物等),可在2-8℃冷藏保存。保存温度过高易导致某些不稳定成分变性或降解。
 (3)光照:所有培养基都应避免阳光直射,置于暗处保存,含对光敏感成分的培养基应采取必要的遮光措施保存。

  小结:环境的湿度、温度和光照是影响培养基保存期限的主要因素,未开封的商品化培养基应按照说明置于相应的条件下保存,已开封的培养基应采取适当的密封措施,或尽可能降低保存环境的温度与湿度,更有利于培养基的保存。


二、实验室自制培养基的保存
  在实验室中,有时配制的培养基用不完,需要存放下次使用,有时候需预制大量培养基待用,经常会遇到半成品培养基的保存问题。决定半成品或成品培养基效期的主要因素是光泽、稳定和密封性。
 (1)成分简单的纯营养类培养基(如只含蛋白胨、氯化钠、磷酸盐等成分相对稳定的培养基,营养肉汤、LB肉汤、缓冲蛋白胨水等):这些培养基相对稳定,通常室温可保存数天或数周,若密封避光冷藏保存,通常可保存数月。
  注:固体培养基用前可水浴加热或用微波炉溶化,通常只能溶化一次,反复的加热溶化会导致营养降低和琼脂变软。
 (2)需添加不稳定成分的不完全培养基(如添加卵黄的MYP、添加羊血的血琼脂、添加抗生素的培养基等):可将未添加不稳定成分的基础培养基在室温(通常可保存数天)或冷藏密封(通常可保存数周或数月)保存,临用前再加入不稳定成分制成完整培养基。若已加入不稳定成分,应在2-8℃冷藏保存,尽快使用。
  注:一些液体培养基可以冷冻保存,融化后不影响使用,但含琼脂的培养基不可以冷冻,结冰会破坏琼脂结构;固体的培养基在使用前需加热溶化后再加入不稳定成分,加入不稳定成分后不可再加热。

 (3)只能加热灭菌或过滤除菌的培养基(如XLD、ya硒酸盐胱氨酸增菌液等,含不耐热成分):此类培养基相对较不稳定,建议现配现用,或2-8℃冷藏保存数日。


三、商品化即用型培养基
 
1)试管或液体瓶装培养基、均质袋等:商品化的即用型通常采取了有效的灭菌方式和密封保存,未开封前按说明保存即可;若已开封,应做好有效措施防止污染,密闭保存,含不稳定成分的应冷藏保存。
  注:一些含染料或酸碱指示剂的培养基应注意避光保存,如煌绿乳糖胆盐、RV肉汤、乳糖蛋白胨等培养基,长时间见光易发生变色。

 (2)琼脂斜面、平皿等:大多数商品化的琼脂培养基建议保存在20℃左右的环境中,含不稳定成分的琼脂培养基可置于5℃左右的冷库中保存。

   ① 目前市场上大多数的平皿保存温度都写室温或5-25℃的一个很宽的保存范围,但在实际保存过程中受水份蒸发和冷凝水的影响,建议保存在20℃左右效果更佳,温度过低易出现冷凝水,温度过高易导致培养基失水。

   ② 不建议使用冰箱保存。冰箱的温度相对不恒定,制冷过程中温度偏低易起霜,易导致培养基结冰,长期在冰箱中保存易导致琼脂出现冰晶,结构被破坏。若要使用冰箱,建议将培养基放置在远离制冷或贴壁的位置,冷藏温度尽量调高一些。

   ③ 拆封后的平皿不易久存,因为在非密闭环境中平皿易逐渐失水变薄。

 (3)即用型生化管、鉴定条等:一些成分简单的生化管(如蛋白胨水、嗜盐性胰胨水等)可在室温条件下存放较长时间,含酸碱指示剂的需要避光保存,在冷藏条件下可保存更长时间。

 (4)试剂盒、染色液等:建议按照说明书保存,冷藏条件更稳定。

  总结:低温、避光、密封和生产工艺是决定即用型培养基有效期长短的关键外在因素。对于含不稳定成分的培养基,低温、避光是延长有效期的重要手段;对于含琼脂的培养基,在冷藏时需注意不可使培养基结冰。


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